突破性进展！肥料中添加24-表、28-高芸苔素内酯能够检测了

　　芸苔素内酯（BRs）是一类甾醇类生长调节物质，被称为第6大类植物激素。

　　BRs在低浓度即可调节植物生长发育、促进植物生长、增产提质，被誉为植物生长调节剂的标杆产品。目前已经产业化生产、推广的主要有24-表芸苔素内酯、22,23,24-表芸苔素内酯、28-表高芸苔素内酯、28-高芸苔素内酯、14-羟基芸苔素甾醇等。

　　需要指出的是，GB/T 37500-2019中提供了十项植调剂产品的检测方法，其中不包括BRs。

　　BRs与肥料配伍施用省工且协同增效，但由于BRs分子中没有对光、电响应高的官能团、挥发性差、离子化难度高，且肥料内存在大量杂质干扰BRs的检测，这给含BRs的质量控制和合理合法使用带来了较大障碍。

　　近日，山东熠辉基因检测技术有限公司联合山东农业大学和山东蓬勃生物科技有限公司在国内核心期刊《分析试验室》网络首发了题为《柱前衍生-高效液相色谱法测定肥料中芸苔素内酯异构体》的文章。该文章建立了以苯硼酸为衍生试剂，柱前衍生-高效液相色谱测定肥料中24-表芸苔素内酯（24-EBL）和28-高芸苔素内酯（28-HBR）的方法，为分析检测提供了技术支撑。

　　以下为文章内容节选，文末附文献下载链接。据了解，22,23,24-表芸苔素内酯、28-表高芸苔素内酯、14-羟基芸苔素甾醇的检测方法也正在紧张研发中。

1　前处理简单，方法易普及

　　通过对流动相、检测波长、萃取溶剂和衍生条件等的优化，样品采用甲醇作为提取溶剂，用苯硼酸在常温条件下衍生30 min，乙腈/水（85/15，V/V）作为流动相，在222 nm波长下进行分析。各物质特征峰完全分离，出峰良好且基线平稳。

2 线性范围内，线性关系良好

　　配制已知浓度的标准工作溶液，经苯硼酸衍生化后按色谱条件进行检测，绘制标准工作曲线。如表1所示，线性范围内具有良好的线性关系，相关系数（r²）均 ≥0.999。

3 方法回收率高

　　为研究该方法对不同基质肥料的适用性，选取4 种不同品种肥料体系—复合肥、水溶肥、微生物菌肥、尿素进行低、中、高 3 个水平的加标回收试验。样品添加回收率为67.1%~128.5%，相对标准偏差（RSD）为 0.09%~2.4%。回收率及相对标准偏差符合检测分析要求。

4 精密度符合检测要求

　　取已知浓度的24-EBL和28-HBR样品，在色谱条件下连续5次进行测定，计算样品的回收率和RSD，如表3 所示，样品回收率为117.8%~119.2%，RSD均为0.05%，符合仪器定量分析要求。

5 重复性良好，方法稳定

　　准确称取空白肥料样品，添加24-EBL和28-HBR标准品溶液，配制成已知浓度为60 mg/L的样品5份，检测结果如表4所示。样品添加回收率为107.1%~107.3%，RSD在0.17%~0.28%范围内，方法准确可靠，满足检测分析要求。

　　综上所述，本方法能够准确测定肥料中24-EBL和28-HBR的含量，规范了植调剂产品的施用，可以作为企业生产质量控制和质检机构质量检测的参考方法。

文献下载链接：

https://kns.cnki.net/kcms/detail/detail.aspx?dbcode=CAPJ&dbname=CAPJLAST&filename=FXSY2022062000F&uniplatform=NZKPT&v=Ti_EmkJLc_M26AudFksrDlUYao1Bh58R9r-bgHPgq7Xxb0g-5JpAmTXEI10Sd8IZ